北京治疗白癜风好处有哪些 http://baijiahao.baidu.com/s?id=1725820796848674143&wfr=spider&for=pc
功能性抗体可以模拟或者干扰生物体内受体-配体的天然生物学反应，也可以对靶细胞或者分子产生生物学效应。可用于体内外的功能学试验，如封闭、中和、清除和激活试验。
BioLegend是一家专业的抗体生产商，提供指标丰富的功能学抗体---LEAFTMpurifiedantibodies。随着生产工艺的提高，BioLegend对LEAFTM功能性抗体进行升级，所有的LEAFTM级别的抗体将逐步升级到UltraLEAFTM级别，使得抗体中内毒素含量进一步降低。
LEAFTM全称LowEndotoxin,Azide-Free，顾名思义该类抗体的特点是低内毒素，不含叠氮化钠，使得抗体用于体内实验时可降低对实验动物的毒副作用。关于LEAFTM和UltraLEAFTM级别纯化抗体区别如下图所示，我们推荐使用UltraLEAFTM级别的抗体。
今天小达君主要讲一下功能学实验中的细胞清除实验
细胞清除：体内，是指注射抗体以消耗靶细胞。在体外，指的是在培养中加入一种抗体来消耗靶细胞。
NK细胞的清除
NK细胞清除抗体
实验方法：
Group1：7只C57BL/6小鼠，静脉注射Ultra-LEAF?Purifiedanti-mouseNK-1.1Antibody（clone：PK）50ug/次，day0,day2,day6天分别注射一次，结束3次抗体注射后第7天获取外周血;
Group2：7只C57BL/6小鼠，静脉注射Ultra-LEAF?PurifiedMouseIgG2a,κIsotypeCtrlAntibody，50ug/次，day0,day2,day6天分别注射一次，结束3次抗体注射后第7天获取外周血;
检测方法:
流式检测
免疫荧光
检测结果：
流式检测小鼠的外周血实验组和对照组数据显示第7天实验组的NK细胞含量为0.24%，对照组为3.63%，NK细胞的清除效率显著。
眼睛角膜新生血管（CNV）的异常增生是导致视力下降甚至失明的主要因素，文章研究NK细胞有促进炎症血管生成的功能。通过构建炎性CNV小鼠模型以及NK细胞的清除来研究NK促血管生成的功能。取小鼠角膜，免疫荧光方法检测CD31抗体来观察血管的生成.
清除NK细胞组和对照组的结果显示，清除NK细胞后CD31的表达量明显降低，间接验证Ultra-LEAF?Purifiedanti-mouseNK-1.1Antibody（clone：PK）抗体对NK细胞的清除功能.
实验参考文献：
HyunSooLee,SimonaL.Schlerethetal.ANovelPro-AngiogenicFunctionforInterferon-γ–SecretingNaturalKillerCells.InvestOphthalmolVisSci.May;55(5):–.
Treg细胞的清除
Treg清除抗体
实验材料：
C57BL/6,4-6weeks,male
实验方法：
小鼠分成两组，腹腔注射（~1.5mg/Kg）;
Group1:腹腔注射Ultra-LEAF?Purifiedanti-mouseCD25Antibody（clone:PC61）30ug/次，每两周注射一次，共3次;
Group2:腹腔注射Ultra-LEAF?Purifiedanti-mouseCD25Antibody（clone:PC61）30ug/次，每两周注射一次，共3次;
检测方法：
流式检测
检测结果：
小鼠外周血，流式检测外周血淋巴细胞中的CD4+CD25+细胞亚群的含量,Treg细胞亚群的含量降低到0.01%，细胞清除率达到99%.
实验参考文献：
OuCao,EricDobrzynski.InductionandroleofregulatoryCD4+CD25+Tcellsintolerancetothetransgeneproductfollowinghepaticinvivogenetransfer.Blood.Aug15;(4):–
B细胞的清除
B细胞清除抗体
实验方案：
取C57BL/6小鼠，分为两组,如下所示，取小鼠的外周血动态检测小鼠外周血中B细胞的含量；在第7天用CO2处死箱处死小鼠，取小鼠的骨髓、脾脏、淋巴结和腹腔灌洗液检测B细胞含量的变化
Group1：静脉注射Ultra-LEAF?Purifiedanti-mouseCD20Antibody（Clone：SAG2）
Group2：静脉注射Ultra-LEAF?PurifiedratIgG2b,κisotypecontrol
检测方法：
流式细胞术：标记各种组织种B细胞鉴定的表面蛋白，流式分析两组样本种B细胞的含量
免疫荧光：制作小鼠脾脏的冰冻切片
实验结果：
骨髓中未成熟B细胞清除明显，前祖B细胞中不表达CD20
脾脏中B细胞含量由55.4%清除到1.46%
淋巴结中B细胞的含量从67.7%清除到2.45%
腹腔灌洗液中B1和B2细胞含量没有出现明显改变
外周血
动态检测小鼠外周血中的B细胞，48h内B细胞含量明显降低，72小时内B细胞几乎完全清除，B细胞含量1%并持续到第4周。
小鼠脾脏冰冻切片
参考文献：
JuanEnriqueMoyron-Quiroz.KineticstudyofBcell-depletionwithanovelmAbanti-mouseCD20,cloneSAG2.TheJournalofImmunology()
粒细胞的清除
粒细胞清除抗体
实验方案：
Group1：C57BL/6J小鼠，腹腔注射ugRB6-8C5抗体，day0,day2各一次，共两次
Group1：C57BL/6J小鼠，腹腔注射IsotypeCtrl抗体，day0,day2各一次，共两次
检测方法：
流式细胞术
实验结果：
抗体组的粒细胞含量为0.1%，对照组的粒细胞含量为1.3%，粒细胞含量出现明显降低
参考文献：
BaptisteN.Jaeger,JeanDonadieuetal.Neutrophildepletionimpairsnaturalkillercellmaturation,function,andhomeostasis.JournalofExperimentalMedicine()
除此之外，BioLegend还提供多种细胞的清除抗体，抗体涉及的克隆号均得到厂家或文献验证。
参考文献：
IsraelskiDM,etal..J.Immunol.:.
DrobyskiW,etal..Blood87:
KummerU,etal..Immunol.Lett.75:.
TengMetal..CancerRes.70:.
RajagopalD,etal..Blood:.
达科为做为BioLegend品牌的独家代理，秉承“至臻品质，至善服务”的理念，致力于为科学研究事业添砖加瓦。
达科为
转载请注明地址:http://www.1xbbk.net/jwbrc/386.html
